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當(dāng)前位置:首頁(yè)技術(shù)文章CCK8實(shí)驗(yàn)步驟

CCK8實(shí)驗(yàn)步驟

更新時(shí)間:2024-12-03點(diǎn)擊次數(shù):3141

一、細(xì)胞活力檢測(cè)CCK8實(shí)驗(yàn)步驟

1.取生長(zhǎng)狀態(tài)良好的細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞密度,按每孔100 μL細(xì)胞懸液接種于96孔板中,同時(shí)設(shè)空白孔(不加細(xì)胞但是加入同體積的培養(yǎng)基)。

注:通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100 μL約含2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100 μL約含5000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。

2.根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)和處理。

3.每孔加入10 μLCCK-8溶液。繼續(xù)孵育1~4 h。

注:CCK-8孵育條件與細(xì)胞培養(yǎng)條件相同。

4. 用酶標(biāo)儀測(cè)定在450 nm處的吸光度。

image.png

二、細(xì)胞活力檢測(cè)CCK8結(jié)果計(jì)算

細(xì)胞存活率(%)

=(ODsample?ODblank)/(ODcontrol?ODblank)×100%

抑制率(%)

=(ODcontrol?ODsample)/(ODcontrol?ODblank)×100%

[]:  ODsample:實(shí)驗(yàn)孔的OD

ODcontrol:對(duì)照孔的 OD

ODblank:空白孔的OD

三、產(chǎn)品推薦

Elabscience增強(qiáng)型細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒(CCK-8)(E-CK-A362)

產(chǎn)品英文名稱(chēng):Enhanced Cell Counting Kit 8 (WST-8/CCK8)

貨號(hào):E-CK-A362

規(guī)格:500Tests、100Tests、500Tests×20

檢測(cè)原理:WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),在電子載體存在的情況下,WST-8被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成水溶性的橙黃色formazan,生成的formazan的量與活細(xì)胞數(shù)量成正比,通過(guò)檢測(cè)在450 nm處的吸光度,可以間接計(jì)算活細(xì)胞的量。

檢測(cè)方法:比色法

樣本類(lèi)型:細(xì)胞

檢測(cè)儀器:酶標(biāo)儀

 

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