熒光原位雜交技術(shù)(FISH)是一種利用熒光信號(hào)檢測(cè)探針的原位雜交技術(shù)。它將熒光信號(hào)的高靈敏度、安全性及直觀性和原位雜交的高特異性結(jié)合起來，通過熒光標(biāo)記的核酸探針與待測(cè)樣本核酸進(jìn)行原位雜交。那么你知道熒光原位雜交的原理是什么嗎？讓我們一起來看看吧！
 

　　FISH的原理：
 

　　FISH分為直接法和間接法。
 

　　直接法是在已知堿基序列的核酸探針上標(biāo)記熒光素，在組織切片、間期細(xì)胞及染色體標(biāo)本上與靶核酸進(jìn)行原位雜交。因所形成的雜交體帶有熒光素。故可在熒光顯微鏡下直接觀察。
 

　　間接法使用非熒光物質(zhì)標(biāo)記的核酸探針。如生物素標(biāo)記探針，再通過親和連接或免疫反應(yīng)帶入熒光物質(zhì)來檢測(cè)雜交體的存在。
 

　　廣義上講，F(xiàn)ISH靶序列可以是DNA或RNA，既可以用來進(jìn)行基因組層面的研究，也可以進(jìn)行表達(dá)層面的研究。
 

　　目前常用的熒光素有異硫氰酸熒光素、得克薩斯紅、羅丹明及其衍生物四甲基異硫氰酸羅丹明等。
 

　　FISH的應(yīng)用：
 

　　1. 染色體分析：FISH技術(shù)可以用于染色體分析，例如通過檢測(cè)染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)異常，了解基因組拷貝數(shù)的變化。這可以幫助診斷染色體疾病，如唐氏綜合癥、 Edwards綜合征等。
 

　　2. 基因定位：FISH技術(shù)可以幫助研究人員確定基因在染色體上的位置，這對(duì)于研究基因功能、基因組進(jìn)化和疾病相關(guān)基因具有重要意義。
 

　　3. 病毒檢測(cè)：FISH技術(shù)可以檢測(cè)病毒基因組，例如艾滋病毒(HIV)、乙型肝炎病毒(HBV)等。這可以幫助研究人員了解病毒在細(xì)胞內(nèi)的位置和復(fù)制情況，為抗病毒治療提供指導(dǎo)。
 

　　4. 腫瘤診斷和預(yù)后評(píng)估：FISH技術(shù)可以用于檢測(cè)腫瘤細(xì)胞內(nèi)的基因異常，如基因擴(kuò)增、缺失和重排。這些信息有助于腫瘤的診斷和預(yù)后評(píng)估，以及指導(dǎo)個(gè)體化治療。
 

　　5. 微生物學(xué)研究：FISH技術(shù)可以檢測(cè)和定位微生物(如細(xì)菌和真菌)的核酸序列，從而了解微生物的種群結(jié)構(gòu)、基因表達(dá)和病原性。
 

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