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哪些因素影響電轉(zhuǎn)效率？
2023-09-08
電轉(zhuǎn)，也稱電穿孔法，是通過脈沖電流在細胞膜上打孔，將外源分子（DNA、RNA、mRNA等）導入真核細胞內(nèi)，來改變細胞的特性，從而達到改造細胞的目的，是實現(xiàn)細胞基因功能和蛋白質(zhì)表達研究的重要工具。那么影響電轉(zhuǎn)效率的因素有哪些呢？讓我們一起來看看吧！一、電轉(zhuǎn)過程1）電轉(zhuǎn)的完整操作步驟包括電轉(zhuǎn)前操作，電轉(zhuǎn)執(zhí)行和電轉(zhuǎn)后培養(yǎng)。在進行電轉(zhuǎn)前操作時，電轉(zhuǎn)試劑、細胞與轉(zhuǎn)染底物要進行混勻，如果混勻時過于激烈，會破壞轉(zhuǎn)染復合物的形成，從而導致轉(zhuǎn)染效率降低；2）在進行電轉(zhuǎn)前操作時，電擊緩沖液的選擇...
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超速離心機分為哪幾類？主要應用于什么？
2023-09-08
超速離心機是一種精密和*的離心機，它以極gao的速度運行并分離出傳統(tǒng)離心機無法分離的較小分子。那么超速離心機分為哪幾類呢？主要應用于什么呢？讓我們一起來看看吧！一、分析型超速離心機（AUC）顧名思義，分析離心機是用于分析樣品中存在的各種顆粒的超速離心機。分析超速離心(AUC)是一種用于定量分析溶液中大分子的通用且穩(wěn)健的方法這些超速離心機具有檢測系統(tǒng)，可實時監(jiān)測顆粒的旋轉(zhuǎn)和位置，以確定沉降系數(shù)，這有助于根據(jù)形狀、大小和質(zhì)量分析顆粒。用于測定大分子的相對分子質(zhì)量的分析超速離心可以...
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蛋白質(zhì)純化有哪些步驟呢？
2023-09-06
蛋白質(zhì)純化是利用基因工程技術將編碼蛋白質(zhì)的核酸序列導入宿主細胞，使其大量表達，然后采用合適的純化方法進行體外純化，以獲得高純度、高活性和高產(chǎn)量的蛋白質(zhì)的過程。那么你知道蛋白質(zhì)純化操作步驟嗎？讓我們一起來看看吧！1、構(gòu)建原核表達質(zhì)粒：目的基因PCR，載體酶切，連接，轉(zhuǎn)化，挑單克隆送測序；2、將構(gòu)建成功的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到BL21（DE3）中，37℃培養(yǎng)過夜，挑單克隆小搖過夜；3、小誘導摸索最佳誘導條件：將搖過夜的菌液1:1000接種到3mLLB中，37℃搖4-5h至菌液OD600=0....
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如何區(qū)分非預染蛋白Marker和預染蛋白Marker？
2023-09-06
蛋白Marker是蛋白分子量標準，是一些已知分子量的蛋白質(zhì)的混合物，像“尺子”一樣用來指示蛋白質(zhì)條帶的大小。那么如何區(qū)分非預染蛋白Marker和預染蛋白Marker呢？讓我們一起來看看吧！非預染蛋白Marker：是幾種已知分子量并純化好的蛋白質(zhì)預混液，方便不同大小的蛋白比較。非預染的Marker使用上不如預染Marker好用，因為電泳過程中完quan看不到，電泳結(jié)束后經(jīng)過蛋白染色后才能起指示作用，無法在實驗過程中起預示參照作用，屬于“后知后覺”型的。但是由于蛋白沒有附帶染料分...
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你知道如何正確使用移液槍嗎？
2023-09-04
移液槍是實驗室必*好工具，是檢驗人的好朋友，配質(zhì)控、加樣都離不開移液槍的幫助，那么你知道怎么才能正確的使用移液槍嗎？讓我們一起來看看吧一、裝吸頭移液器套柄用力下壓，需要時小幅度旋轉(zhuǎn)即可。錯誤操作：用力敲擊吸頭。此方法會帶來吸頭損壞甚至移液器套柄磨損，從而影響其密封性。不可以把槍頭提起來，再往下用力懟槍頭盒，這個非常錯誤二、吸頭浸入角度吸液時盡量保持垂直狀態(tài)，傾斜角度不能超過20°三、吸液速度勻速連貫吸液，控制好吸液速度，太快會造成噴液，液體或者氣霧沖入移液器內(nèi)部，污染活塞等部...
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你知道什么是ELISA嗎？
2023-09-04
酶聯(lián)免疫吸附測定（enzymelinkedimmunosorbentassay，簡寫ELISA或ELASA）指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體特異性結(jié)合進行免疫反應的定性和定量檢測方法。1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測定（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）用于IgG定量測定的文章，使得1966年開始用于抗原定位的酶標抗體技術發(fā)展成液體標本中微量物質(zhì)的測定方法。這一方法的基本原理...
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腺相關病毒（AAV）滴度快速檢測試劑盒的介紹
2023-09-01
腺相關病毒（adeno-associatedvirus，AAV）,也稱腺伴隨病毒,屬于微小病毒科依賴病毒屬,是目前發(fā)現(xiàn)的一類結(jié)構(gòu)最jian單的單鏈DNA缺陷型病毒，需要輔助病毒（通常為腺病毒）參與復制。那么想要真正準確可靠地檢測腺相關病毒（AAV）滴度該怎么辦呢？讓我們一起來看看吧！AAV基因組為4.8kb的線狀單鏈DNA；AAV免疫原性低，基因持續(xù)表達半年以上；AAV具有多種血清型，可以特異性靶向感染不同的組織或器官，是動物活體基因轉(zhuǎn)導的shou選工具！腺相關病毒血清型眾多...
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免疫熒光（IF）實驗常見問題有哪些？解決方案有什么？
2023-09-01
免疫熒光技術是根據(jù)抗原抗體反應的原理，先將已知的抗原或抗體標記上熒光素，制成熒光抗體，再用這種熒光抗體（或抗原）作為探針檢測組織或細胞內(nèi)的相應抗原（或抗體）。那么你知道在免疫熒光（IF）實驗中會遇到那些問題以及這些問題的解決方法嗎？讓我們一起來看看吧！問題一：目標蛋白熒光很弱，導致組間差異不顯著，導致假陰性結(jié)果解決方案：出現(xiàn)這種情況后，首先檢查抗體是否正確，是否適用于預處理的組織。有些抗體只適用于冰凍切片，但如果應用于石蠟切片，則會出現(xiàn)弱標記或無標記現(xiàn)象。然后通過文獻了解目的...
服務熱線：022-66387942
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