-
細(xì)胞凍存的原理是什么？
2024-01-15
細(xì)胞凍存是指將細(xì)胞放在低溫環(huán)境，以達(dá)到減少細(xì)胞代謝的作用，從而達(dá)到對(duì)細(xì)胞進(jìn)行長(zhǎng)期儲(chǔ)存進(jìn)行保種的目的，以供后續(xù)實(shí)驗(yàn)或臨床使用。那么你知道細(xì)胞凍存的原理是什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、細(xì)胞凍存原理1.當(dāng)溫度低至-70℃時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的酶活性全部停止，代謝活動(dòng)停止，故實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期保存的目的。2.隨著溫度降低，細(xì)胞內(nèi)外的水分都會(huì)結(jié)晶，所形成的冰晶會(huì)造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞，從而引起細(xì)胞死亡，特別是0~-20℃的階段，冰晶呈針狀，及其引發(fā)細(xì)胞損傷。在不加任何保護(hù)劑條件下直接凍存細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞內(nèi)...
-
細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)的操作方法
2024-01-12
細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)是用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞增殖能力、侵襲性、對(duì)殺傷因素敏感性等項(xiàng)目的重要技術(shù)方法?？寺⌒纬梢罁?jù)采用的培養(yǎng)介質(zhì)的不同，可分為平板克隆和軟瓊脂克隆兩類。那么你知道這兩種細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)的操作方法嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、平板克隆1.所需材料基礎(chǔ)培養(yǎng)基（根據(jù)細(xì)胞選擇適用種類）胎牛血清、胰蛋白酶、PBS、青霉素-鏈霉素溶液（100X）、多聚甲醛固定、結(jié)晶紫染液、Giemsa染液、2.實(shí)驗(yàn)步驟（1）6孔板1）將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞胰酶消化后，wan全培養(yǎng)基（基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%胎牛血清...
-
細(xì)胞克隆的原理與分類
2024-01-12
細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)是用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞增殖能力、侵襲性、對(duì)殺傷因素敏感性等項(xiàng)目的重要技術(shù)方法。那么你知道細(xì)胞克隆的原理與分類嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、原理當(dāng)單個(gè)細(xì)胞在體外增殖6代以上，其后代所組成的細(xì)胞群體，成為集落或克隆。其中細(xì)胞克隆形成率即細(xì)胞接種存活率，表示接種細(xì)胞后貼壁的細(xì)胞成活并形成克隆的數(shù)量。貼壁后的細(xì)胞不一定每個(gè)都能增殖和形成克隆，而形成克隆的細(xì)胞必為貼壁和有增殖活力的細(xì)胞?？寺⌒纬陕史从臣?xì)胞群體依賴性和增殖能力兩個(gè)重要性狀。二、克隆形成的目的1）檢測(cè)細(xì)胞經(jīng)干預(yù)處理后...
-
你知道什么是細(xì)胞凍存液?jiǎn)幔?/a>
2024-01-11
細(xì)胞凍存技術(shù)是指將活細(xì)胞在低溫下保存，使其保持活力，以便在需要時(shí)取出來(lái)進(jìn)行復(fù)蘇。那么你知道什么是細(xì)胞凍存液?jiǎn)?？讓我們一起?lái)看看吧！一、細(xì)胞凍存液的主要成分細(xì)胞凍存液在細(xì)胞凍存過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用，它能夠在低溫下保護(hù)細(xì)胞免受冰晶的損傷，并維持細(xì)胞的活性。細(xì)胞凍存液通常含有以下成分：1.二甲基亞砜（DMSO）：DMSO是一種有機(jī)溶劑，可以降低細(xì)胞膜的滲透壓，防止細(xì)胞因冰晶形成而破裂。2.胎牛血清（FBS）：FBS含有豐富的蛋白質(zhì)和生長(zhǎng)因子，可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)和保護(hù)。3.肝素：肝...
-
血清和無(wú)血清培養(yǎng)基都有哪些不同？
2024-01-11
血清培養(yǎng)基和無(wú)血清培養(yǎng)基都是用于細(xì)胞培養(yǎng)的重要培養(yǎng)基類型，那么你知道血清和無(wú)血清培養(yǎng)基都有哪些不同嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、成分和來(lái)源血清培養(yǎng)基：包含動(dòng)物血清，通常是胎牛血清。血清中含有多種生長(zhǎng)因子、激素、蛋白質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，為細(xì)胞提供生長(zhǎng)和增殖所需的支持。無(wú)血清培養(yǎng)基：不含動(dòng)物血清成分，是由合成的、精確定義的化學(xué)成分組成。這種培養(yǎng)基通常包含精確配比的細(xì)胞生長(zhǎng)因子、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和其他必需的生長(zhǎng)組分。二、培養(yǎng)效果和適用性血清培養(yǎng)基：對(duì)于多種細(xì)胞類型有較好的適應(yīng)性，因?yàn)檠逯泻卸喾N...
-
?Tunel檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)步驟與注意事項(xiàng)
2024-01-10
TUNEL檢測(cè)是一種用于檢測(cè)細(xì)胞凋亡（程序性細(xì)胞死亡）的方法。細(xì)胞凋亡是一種重要的細(xì)胞生物學(xué)過(guò)程，它在多種生理和病理情況下發(fā)揮作用，包括發(fā)育、組織修復(fù)和免疫應(yīng)答等。那么你知道Tunel檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)步驟與注意事項(xiàng)嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、Tunel檢測(cè)的操作步驟1.脫蠟和組織復(fù)性將組織在二甲苯中浸泡兩次，每次10-20分鐘。在100%乙醇中洗滌兩次，每次5分鐘。然后依次在95%，70%和50%乙醇中洗滌3分鐘。2.PBS洗滌和蛋白酶處理用200-500µLPBS洗滌...
-
細(xì)胞傳代培養(yǎng)的常見問(wèn)題有哪些？
2024-01-10
細(xì)胞培養(yǎng)是指從體內(nèi)組織取出細(xì)胞在體外模擬體內(nèi)環(huán)境下，在無(wú)菌、適溫和豐富的營(yíng)養(yǎng)條件下，使其生長(zhǎng)繁殖，并維持其結(jié)構(gòu)和功能的一種培養(yǎng)技術(shù)。那么你知道細(xì)胞傳代培養(yǎng)的常見問(wèn)題有哪些嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、細(xì)胞何時(shí)進(jìn)行傳代通常當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)至wan全匯合進(jìn)行傳代，避免細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)密，對(duì)于特殊情況，比如有接觸抑制的細(xì)胞，一般在密度70-80%就進(jìn)行傳代，避免引起細(xì)胞分化。二、貼壁細(xì)胞胰酶消化如何控制時(shí)間貼壁細(xì)胞培養(yǎng)一個(gè)關(guān)鍵步驟胰酶消化，消化過(guò)度會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞碎片增多，細(xì)胞成片脫落，嚴(yán)重影響細(xì)胞活...
-
雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)有哪些？
2024-01-09
雙螢光素酶報(bào)告基因通常以螢火蟲螢光素酶為報(bào)告基因，以海腎螢光素酶為內(nèi)參基因，如此所構(gòu)成的報(bào)告系統(tǒng)有檢測(cè)靈敏度高、動(dòng)態(tài)范圍廣、內(nèi)參平衡等優(yōu)勢(shì)，因此在實(shí)驗(yàn)中得到廣泛應(yīng)用。那么你知道雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)有哪些嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、熒光值過(guò)高熒光值過(guò)高可能會(huì)超出儀器檢測(cè)范圍，從而檢測(cè)不到值，一般讀數(shù)在5-6位之間較好。熒光值過(guò)高可通過(guò)以下方式嘗試解決：1.減少質(zhì)粒轉(zhuǎn)染量；2.細(xì)胞樣品裂解后，離心取上清后檢測(cè)或?qū)α呀猱a(chǎn)物進(jìn)行稀釋后檢測(cè)。（注：不建議通過(guò)減少底物量來(lái)降低熒光值，...
服務(wù)熱線：022-66387942
掃碼加微信
當(dāng)前位置：
技術(shù)文章