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影響免疫組化(IHC)實驗結果的因素有哪些?
2023-10-08
免疫組化技術是利用已知的特異性抗體或抗原能特異性結合的特點,通過化學反應使標記于結合后的特異性抗體上的顯示劑通過借助顯微鏡的觀察,從而在抗原抗體結合部位確定組織細胞結構的一門組化技術。那么影響免疫組化實驗結果的因素有哪些呢?讓我們一起來看看吧!一、組織的固定組織固定的好壞直接影響免疫組化的結果,選擇良好的固定液并及時充分的固定可以防止組織自溶,最大限度保留組織的抗原性,保證免疫組化結果的準確性。常用固定液:10%的中性緩沖福爾馬林(40%甲醛10ml+0.01mol/LPBS...
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影響免疫熒光(IF)實驗結果的因素有哪些?
2023-10-08
免疫熒光染色技術是一種以免疫學為基礎,結合生物化學技術和顯微技術發(fā)展而來的蛋白等分子檢測技術。那么你知道影響免疫熒光(IF)實驗結果的因素有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!一、免疫熒光染色方法的選擇免疫熒光染色技術分為直接法和間接法。直接法:將熒光標記物偶聯(lián)在抗原/抗體上,直接與相應的抗體/抗原反應。間接法:先用未標記的一抗與抗原充分反應后,再利用熒光標記的二抗與已經(jīng)結合在抗原上的一抗結合,達到檢測抗原的目的。優(yōu)點缺點直接法操作簡單、特異性高,非特異性染色少便于相同宿主來源的不同...
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影響ELISA結果的因素有哪些?
2023-10-08
ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗是目前臨床上zui常用的免疫學檢驗方法,由于其試劑穩(wěn)定,易保存,操作簡便,結果判斷較客觀,既適宜于大規(guī)模篩查試驗,又可用于少量標本的檢測,既可以做定性試驗也可以做定量分析,目前已廣泛用于微生物學、寄生蟲學、腫瘤學和細胞因子檢測等領域。那么你知道影響ELISA結果的因素有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!一、樣品樣品是檢測的前提,樣品質(zhì)量會直接影響實驗結果??梢杂肊LISA來檢測的樣品很多,根據(jù)檢測項目不同可以是血清、血漿、唾液、尿液等,但大部分還是以血清為...
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RNA提取的注意事項有哪些?
2023-10-07
RNA是目前發(fā)現(xiàn)細胞內(nèi)生物功能zui豐富多樣的生物大分子,同時是DNA與蛋白質(zhì)信息傳遞的橋梁,因此完整RNA的提取和純化是功能基因組時代的重要手段。那么你知道RNA提取的注意事項都有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!一、如何保存提取出的RNA?提取后溶解于RNase-freeWater中,RNA樣品建議立即進行下游實驗,如需儲存,建議分裝保存于-80℃。避免多次取用樣品,反復凍融。二、為什么提取的RNA有降解?1.使用的組織材料不新鮮。提取RNA應采用新鮮的組織材料,或?qū)⑿迈r組織材...
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你知道PCR檢測技術的分類嗎?
2023-10-07
分子診斷技術是指以DNA和RNA為診斷材料,用分子生物學技術通過檢測基因的存在、缺陷或表達異常,從而對人體狀態(tài)和疾病作出診斷的技術。其基本原理是檢測DNA或RNA的結構是否變化、量的多少及表達功能是否異常,以確定受檢者有無基因水平的異常變化,對疾病的預防、預測、診斷、治療具有重要意義。那么你知道PCR檢測技術的分類嗎?讓我們一起來看看吧!PCR技術是一種用于擴增特定DNA片段的分子生物學技術,基本原理是在反應室中模擬細胞內(nèi)的DNA復制,即人為創(chuàng)造核酸半保留復制條件,使目的DN...
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內(nèi)切酶實驗的注意事項有哪些?
2023-10-07
你知道內(nèi)切酶實驗的注意事項有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!一、限制性內(nèi)切酶一般反應條件當進行限制性酶切反應時,為確保最佳的反應條件,務必要遵守限制性內(nèi)切酶供應商提供的建議。在此過程中需要考慮的重要參數(shù)包括:底物(DNA)和酶的量、反應體積以及孵育時間。根據(jù)傳統(tǒng)的定義,在最佳反應條件下,一個單位的限制性內(nèi)切酶可以在1小時內(nèi),在50μL體系中wan全酶切1μL定義底物(例如,質(zhì)粒pUC19)。盡管單位定義提供了一種測定方式,但還需注意,根據(jù)DNA底物之中的識別序列出現(xiàn)的頻率及所用底...
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熒光原位雜交實驗的原理是什么?
2023-10-07
熒光原位雜交(FluorescenceinsituhybridizationFISH)是一門新興的分子細胞遺傳學技術,是20世紀80年代末期在原有的放射性原位雜交技術的基礎上發(fā)展起來的一種非放射性原位雜交技術。目前這項技術已經(jīng)廣泛應用于動植物基因組結構研究、染色體精細結構變異分析、病毒感染分析、人類產(chǎn)前診斷、腫瘤遺傳學和基因組進化研究待許多領域。那么你知道熒光原位雜交實驗的原理是什么嗎?讓我們一起來看看吧!熒光原位雜交(Fluorescenceinsituhybridizat...
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你知道熒光原位雜交實驗的方法與步驟是什么嗎?
2023-10-07
熒光原位雜交是一門新興的分子細胞遺傳學技術,目前這項技術已經(jīng)廣泛應用于動植物基因組結構研究、染色體精細結構變異分析、病毒感染分析、人類產(chǎn)前診斷、腫瘤遺傳學和基因組進化研究待許多領域。那么你知道熒光原位雜交實驗的方法與步驟是什么嗎?讓我們一起來看看吧!一、探針變性將探針在75℃恒溫水浴中溫育5min,立即置0℃,5~10min,使雙鏈DNA探針變性。二、標本變性(1)將制備好的染色體玻片標本于50℃培養(yǎng)箱中烤片2~3h。(經(jīng)Giemsa染色的標本需預先在固定液中退色后再烤片)。...