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無菌操作的注意事項有哪些？
2023-11-07
無菌操作或是說無菌操作技術(shù)在醫(yī)療護理或微生物檢驗過程中是bi不可少的技術(shù)。那么你知道無菌操作的注意事項有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、擦拭實驗過程中需要擦拭的對象有工作臺面、手套、瓶皿/孔板表面、耗材/器械表面。對于工作臺面，在實驗開始前、結(jié)束后都需要試用70%乙醇擦拭，如果實驗過程中出現(xiàn)液體滴落在臺面，也需要擦拭臺面后才能繼續(xù)實驗；對于手套，除了佩戴一次性滅菌處理過的手套外，整個實驗過程都應(yīng)間隔一段時間就擦拭手套一次；對于瓶皿/孔板，如果實驗過程中被拿出過生物安全柜范圍以...
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細胞培養(yǎng)基要不要加雙抗？血清在使用之前是不是一定要滅活？
2023-11-07
你知道細胞培養(yǎng)基要不要加雙抗嗎？血清在使用之前是不是一定要滅活？讓我們一起來看看吧！一、是否要加雙抗在培養(yǎng)基中添加抗生素是一種常見的操作，其主要作用是抑制或殺死培養(yǎng)物中的某些細菌或真菌，從而避免它們對目標(biāo)細胞的干擾和污染。在培養(yǎng)實驗中，選擇適當(dāng)濃度和種類的抗生素，可以有效地消除或減少雜菌、污染菌或其他不需要的微生物，保證培養(yǎng)物的純度和穩(wěn)定性。同時，添加抗生素還可以用來篩選或檢測耐藥性菌株，評估其對抗生素的敏感性和耐受性。但是，添加抗生素并不能確保你的細胞一定不被微生物污染，因...
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PAS糖原染色的常見問題有哪些？如何解決？
2023-11-06
PAS糖原染色的常見問題有哪些？如何解決？PAS糖原染色實驗是通過特殊的化學(xué)反應(yīng)使細胞和組織中的糖原與染料結(jié)合，形成紫紅色或洋紅色的顏色，從而可視化糖原的分布和定量。PAS染色又稱過碘酸雪夫染色，糖原染色。一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。那么你知道PAS糖原染色的常見問題有哪些嗎？該如何解決呢？讓我們一起來看看吧！一、染色結(jié)果不明顯或弱①糖原濃度低：如果樣品中的糖原含量較低，則染色結(jié)果可能會很弱?？梢試L試增加染色時間或使用更敏感的檢測方法。②酶消化不充分：細胞或組織中存在其他...
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如何選擇合適的感受態(tài)細胞
2023-11-06
細菌轉(zhuǎn)化是受體細菌以低頻率從環(huán)境中吸收外源DNA的天然過程，經(jīng)轉(zhuǎn)化后的細菌可表達相應(yīng)的遺傳形狀，是遺傳多樣性的來源之一，也可能為宿主細菌帶來額外的好處（如抗生素抗性）。感受態(tài)細胞是通過物理或化學(xué)方法進行誘導(dǎo)，使其處于最適攝取或容納外源DNA的生理狀態(tài)，可高效吸收環(huán)境中的DNA分子。那么你知道該如何選擇合適的感受態(tài)細胞嗎？讓我們一起來看看吧！感受態(tài)細胞常用于分子克隆中，用于復(fù)制增殖重組DNA分子。但感受態(tài)細胞多種多樣，當(dāng)選擇感受態(tài)細胞進行轉(zhuǎn)化時，需要考慮多種因素，如轉(zhuǎn)化方式、轉(zhuǎn)...
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原代細胞培養(yǎng)的常見問題
2023-11-02
原代細胞培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)，是建立細胞系的第一步，其步驟包括取材→分離→培養(yǎng)和維持。那么你知道原代細胞培養(yǎng)的常見問題有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、倍增和代數(shù)有什么區(qū)別倍增是培養(yǎng)物中細胞總數(shù)的翻倍，通常是指細胞指數(shù)或?qū)?shù)生長期。代數(shù)是指細胞群從培養(yǎng)瓶中移出，傳代培養(yǎng)過程的次數(shù)，傳代培養(yǎng)的目的，是使細胞處于低密度以刺激其進一步生長。二、接收到的凍存細胞該如何處理收到包裝箱后，立即將凍存細胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快，以避免升溫。不要將細胞儲存在-80℃，這樣會對細胞造成...
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免疫共沉淀實驗操作有哪些？
2023-11-02
免疫共沉淀（CO-IP）是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。那么你知道免疫共沉淀實驗操作有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、蛋白樣品制備裂解提取出免疫沉淀需要的蛋白樣品，以下為HEK293T細胞樣品的處理方法，其余的樣品制備方法參閱相關(guān)文獻。單層貼壁細胞總蛋白的提取：1.收集細胞：10cm細胞培養(yǎng)板上，每板細胞加1ml，4℃預(yù)冷的PBS（0.01MpH7.2～7.3）。反復(fù)沖洗把所有掛壁細胞洗下來轉(zhuǎn)移到1.5ml離心管內(nèi)離心：3400rpm2...
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研究蛋白質(zhì)相互作用的方法有哪些？
2023-11-02
相當(dāng)多的蛋白質(zhì)行使功能的時候并不是單打獨斗的，蛋白質(zhì)們通過蛋白質(zhì)相互作用形成復(fù)合體然后進行工作。因此，研究蛋白質(zhì)的相互作用成為研究蛋白質(zhì)功能和作用機制的最為重要的環(huán)節(jié)之一。那么你知道研究蛋白質(zhì)相互作用的方法有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、酵母雙雜交系統(tǒng)原理：很多真核生物的位點特異轉(zhuǎn)錄激活因子通常具有兩個可分割開的結(jié)構(gòu)域，即DNA特異結(jié)合域（DNA-bindingdomain,BD）與轉(zhuǎn)錄激活域（Transcriptionalactivationdomain,AD）。這兩個結(jié)...
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ELISA實驗的操作要點有什么？
2023-11-01
優(yōu)質(zhì)的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異，那么你知道ELISA實驗的操作要點有什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、標(biāo)本的采取和保存可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛，體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進行測定(如血清、尿液)，有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白...
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